[發明專利]一種新的多肽——人高爾基運輸小泡蛋白gamma－COP13.53和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00135139.7
• 申請日: 2000-12-20
• 公開（公告）號: CN1359933A
• 公開（公告）日: 2002-07-24
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

內質網里合成蛋白質是通過高爾基體運載小泡運輸至血漿膜表面的(Rothman，J.et?al.，1992，Natrure，355，409-415)。高爾基運載小泡來源于帶有細胞溶膠和ATP的高爾基膜孵化(Orci，L.et?Al.，1986，Cell，46，171-184)。這些運載小泡就叫COPI-包被小泡，它們的直徑一致大約為75納米并且包含一個有細毛的蛋白質外被。其外被蛋白包括外被體和ADP-核糖基化因子兩部分(Serafini，T.etal.，1991，Nature，349，215-220)。外被體是一個蛋白質復合體，由7個亞基組成，分別是α、β、β、γ、δ、ε，ζ-COP。外被體以可溶的形式存在于細胞質中，當COPI包被小泡形成時，外被體就聚集到高爾基膜上(Palmer，D.etal.，1993，J.Biol.Chem.268，12083-12089)。哺乳動物和酵母細胞的外被體在體內結合一些融合蛋白，這些融合蛋白包含dilysine基元，該基元是內質網膜蛋白在細胞質中的典型尾部(Cosson，P.et?al.，1994，Science，263，1629-1631)。該KKXX基元位于C末端，作為膜蛋白從內質網到后內質網的運輸信號G(Gaynor，E.C.etal.，1994，Cell?Biol.127，653-655)。

COPI包被小泡所包被的膜蛋白是P23和P24家族。P24家族蛋白質包括一個大的luminal結構域，一個單獨的轉膜結構域和一個短的胞質尾巴。COPI包被小泡的外被體能與所有的內質網提取基元以及P24家族成員的二苯胺基元結合(Sohn，K.etal.，1996，J.Cell?Biol，135，1239-1248)。這表明包被復合體參與了蛋白質的逆行轉運(Cosson，P.et?al.，1994，Science，263，1629-1631)。在外被體與P23結合過程中，γ-COP是與P23特異性結合的外被體亞基。并且，Wbplp和P23胞質尾巴分享一個共同的γ-COP結合位點。上文所提的融合蛋白中的KKXX基元也是和γ-COP結合的。

γ-COP是唯一的外被體標記蛋白，不僅是因為它與P23多肽結合，還因為它在瓊脂糖顆粒表面和膜的細胞質結構域模擬突起中所表現的獨立方式。γ-COP基因編碼一個874個氨基酸的蛋白質，分子量為97,385。γ-COP可能功能就是與KKXX基元結合調節膜蛋白到COPI包被小泡的逆行性分裝。

通過基因芯片的分析發現，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質瘤中，本發明的多肽的表達譜與人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53。

由于如上所述人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——入高爾基運輸小泡蛋白gamma-COP13.53的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。