[發明專利]蟲草素提取工藝及制劑

無效

• 申請號: 00130376.7
• 申請日: 2000-11-06
• 公開（公告）號: CN1294133A
• 公開（公告）日: 2001-05-09
• 發明（設計）人: 徐哲;苑桂華;王波
• 申請（專利權）人: 吉林東北虎藥業股份有限公司
• 主分類號: C07H19/16
• 分類號: C07H19/16;A61K35/78;A61K31/7076;A61K9/19;A61K9/08;A61K9/20;A61P31/12;A61P35/00
• 代理公司: 農業部專利事務所
• 代理人: 董金和

本發明涉及藥用真菌領域，特別是涉及從蟲草中提取蟲草素的工業化工藝，本方面還涉及利用蟲草素制備的醫藥制劑。

據報導，蟲草屬菌中的冬蟲夏草、蛹蟲草、人工培養蛹蟲草菌絲等多種蟲草中的化學成分基本一致。除含有甾醇類、糖醇類、有機酸及氨基酸等化合物外還含有蟲草素(Cordycepin)即3＇-脫氧腺苷(3＇-Doxyadenosine)3＇-氨基3＇-脫氧腺苷及其他核苷類等生理活性成分。Cunnigham等早期用Dowex-1-ce樹脂從蛹蟲草〔Cordyceps?militaris(L)link〕中提取得蟲草素。經研究證明蟲草素有抗病毒、抗腫瘤、抑制癌細胞分裂等作用。腺苷具有舒張血管、降低血壓、減慢心率、抑制血小板凝集等多種生理活性。目前國內外一些學者采用高效液相色譜法、薄層層析法等測定多種蟲草菌中蟲草素及腺苷的含量，并也有從冬蟲夏草發酵菌絲及人工培養蛹蟲草米飯培養基固體殘渣中提出蟲草素的報導。但目前為止以工業化為目標提取蟲草素結晶體的工藝流程技術，并將其制成蟲草素系列制劑的深層次分離開發新藥制品，尚未有報道。

本發明目的之一提供從蟲草菌中提取蟲草素(3＇-氨基-3＇-脫氧腺苷)結晶體的工業化生產工藝流程。

本發明的目的之二是將蟲草素制成針劑、乳劑、脂質體等制劑，使中藥產品達國際先進水平，開辟藥學方面新用途。

本發明是如下所述完成

1、蟲草素提取工藝

將蟲草置于60℃-80℃的干燥箱中進行干燥，然后粉碎，過40-60目篩備用，取粉碎后的原料加5倍30％乙醇(溫度70℃)浸泡24-48小時，將浸泡后的混懸液上回流裝置，加熱回流2小時，回收乙醇，加水沉淀，調pH3．5，24小時后過濾，將回收后的藥液加水溶解進行冷藏沉淀，溫度4℃，時間24小時。將冷置后的藥液用微孔濾膜進行過濾(0．85μm)濾液用0．1mol／L調4．0備用，上離子換柱，收集洗脫液，將洗脫液進行減壓濃縮至粘稠狀，將粘稠的液體于4℃，冷置24小時使之結晶析出，過濾，上述濾液加適量正丁醇，置4℃，冷置24小時使之結晶析出，過濾，濾液如此反復處理2-3次，將過濾所得結晶至冷凍干燥機中進行干燥，即得。

高效液相法檢查蟲草素含量

(1)標準曲線制備：

分別吸取0．46mg／ml的標準溶液0．25、0．5、0．75、1．00、1．25、1．5ml配成2．5ml的系列標準液，分別進樣20ml進行高效液相法含量測定。條件：固定相250×4．6mmODS柱。流動相：水∶甲醇∶四氫呋喃(70∶20∶10)的碳酸銨緩沖液pH=6，柱前壓40kg／cm²，流速1ml／min溫度16℃。以積分值對測試液濃度作回歸處理，在0．92-5．5mg范圍內呈良好的線性關系，回歸方程：

y=3．1×10-6x-0．0456γ=0．9966

(2)樣品制備：取蛹蟲草1g于是塞管內，先乙醚脫脂(10ml×3次)涼干后取10ml乙醇浸72小時，取浸液5ml，通過裝2g的硅膠小柱，用甲醇洗至50ml做樣品測試液，進樣20ml，結果與標準品基本一致，加樣回收率97．3±4．8％，n=4。

2．蟲草素制劑生產工藝流程

(1)蟲草素凍干粉針

將蟲草素溶解于注射用水，加入配料甘露醇，EDTA-2Na，用針用活性炭0．2％，吸附30分鐘，用濾紙過濾掉活性炭，用0．12μm濾膜，過濾，用0．15μm濾膜，除菌過濾，分裝為每瓶0．1克蟲草素，上塞，軋蓋，包裝。

(2)蟲草素注射液

將蟲草素溶解于注射用水，然后加入EDTA-2Na，攪拌溶解，加水至1000ml，加針用活性炭0．2％，攪拌吸附30分鐘，用濾紙過濾掉活性炭，用0．22μm濾膜，精濾、分裝于2ml安瓶中(每只相當于蟲草素0．1g)溶封于100℃流通蒸汽滅菌30分鐘，燈檢包裝。

(3)蟲草素糖衣片

取蟲草素淀粉加10％淀粉糊制成軟材，用16#篩進行制粒，14#篩整粒，加入適量滑石粉攪均，用直徑=8mm淺弧沖打片、包衣、干燥、分裝、包裝即得。

(4)蟲草素滴丸

稱取處方量的聚乙二醇6000，聚乙二醇10000于80℃進行熔融，然后加入蟲草素繼續加熱，攪拌均勻，然后上滴丸機，采用下列方法進行滴制，每丸重25mg，取丸、甩干，吸去多余冷卻液、干燥、分裝即得。

本工藝技術特征：