[發(fā)明專利]一種新的多肽——鉀離子通道12.21和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00127549.6
• 申請日: 2000-11-24
• 公開（公告）號: CN1355185A
• 公開（公告）日: 2002-06-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué);上海博道基因技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 陸飛,姚靜芳

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——鉀離子通道12.21，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

運輸?shù)鞍资强缒さ鞍追肿踊蚴谴蟮目缒し肿訌?fù)合物，通過被動轉(zhuǎn)運，按濃度梯度通過細(xì)胞膜。它以多種形式存在，并發(fā)現(xiàn)存在于各種生物膜中。參與被動運輸?shù)闹匾倪\輸?shù)鞍子幸韵聨追N：通道蛋白(channel?proteins)，門通道(gatedchannels)或稱門微孔(gated?pores)，載體蛋白。

門通道具有的“門”不是連續(xù)開放，而是瞬時地開放，僅在對特定的刺激發(fā)生反應(yīng)時打開，其他時間是關(guān)閉的。門通道可分為配體門通道(ligand?gatedchannel)和電位門通道(voltage?gated?channel)。電位門通道是對細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外特異離子濃度發(fā)生改變時，或?qū)ζ渌碳ひ鹉る娢蛔兓瘯r，致使其構(gòu)像變化，“門”打開。在很多情況下，門通道有它自己的關(guān)閉機制，它能快速自發(fā)地關(guān)閉，開放常常只有幾毫秒的時間。在這短暫瞬時的開放時間里，一些離子，代謝物或其他溶質(zhì)順著濃度梯度自由擴散進入細(xì)胞膜。門通道的開放和關(guān)閉常常是連續(xù)相繼的過程。在這一過程中，物質(zhì)通過第一個門通道系統(tǒng)進入，引起另一門通道的開放。第一門通道的快速關(guān)閉，調(diào)整了第二個門通道的活動，它還可以引起其他特定刺激的門通道開放，盡管原來使其開放的刺激仍在起作用，通道也能快速地關(guān)閉。作為門通道，他們可選擇不同的離子，讓它們通過細(xì)胞膜，這決定了突觸后反應(yīng)的類型。

電位門鉀離子通道是心臟活動電壓的重要調(diào)節(jié)者。鉀離子通道含有兩個亞基-α亞基和β亞基，其中β亞基存在于它本身的組織中，它是運動調(diào)節(jié)亞基。hKvβ3是一種位于人心室的電位門鉀離子通道β亞基，其編碼基因位于第三條染色體上。RNA分析顯示，hKvβ3在人心室中的量是在心房中的兩倍，它在健康的和有病的心臟中同時存在。hKvβ3與心臟的延遲整流器一起，可以增強心臟的鈍化作用，誘導(dǎo)活化曲線的超異化上升18-mV，減緩釋放。(Sarah?K，et.al，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，92.6309-6313，1995)

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在正常腦、肝癌、肌肉、胎腦、胎腎，胎肺、胎肝、甲狀腺、胸腺、成人肝、肺、膠質(zhì)瘤中，本發(fā)明的多肽的表達譜與鉀離子通道的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為鉀離子通道12.21。

由于如上所述鉀離子通道12.21蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的鉀離子通道12.21蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新鉀離子通道12.21蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——鉀離子通道12.21以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼鉀離子通道12.21的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼鉀離子通道12.21的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)鉀離子通道12.21的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——鉀離子通道12.21的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——鉀離子通道12.21的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與鉀離子通道12.21異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中1047-1382位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-1952位的序列。