[發明專利]一種新的多肽——人EHD蛋白9.57和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116935.1
• 申請日: 2000-06-30
• 公開（公告）號: CN1331217A
• 公開（公告）日: 2002-01-16
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人EHD蛋白9.57，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

神經膠質瘤中的患者中可以發現染色體19q13.3部位常常缺失，提示這一區域可能存在腫瘤抑制基因。現在已經在這一區域發現了許多基因，其中一個是EHD2。EHD2與人的EHD1基因，果蠅的PAST1基因，和嚙齒類的ehd1基因同源。這些基因組成了一個高度保守的基因家族，其編碼的蛋白都含有EH結構域。EH結構域在細胞內吞和受體酪氨酸激酶的信號傳導途徑下游中起作用。還在蛋白轉移，分選等方面發揮作用。鈣離子對EH結構域起到調節的功能。這一家族的蛋白可能參與許多細胞信號級聯的途徑。

EHD1在一些細胞質小泡結構中發現，例如內吞小泡和高爾基體。EHD1蛋白可以與AP2接頭蛋白復合物結合計時細胞內吞小泡的形成。Ehd1在小鼠的胚胎發育中表達，還在雄性生殖細胞，脂肪細胞，視網膜，子宮，骨骼肌和腎臟中表達。EDH1還可能是胰島素類似的生長因子IFG1的配體?！綠enomics63，255-262，2000】

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人EHD1蛋白的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人EHD蛋白9.57。

由于如上所述人EHD蛋白9.57蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人EHD蛋白9.57蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人EHD蛋白9.57蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人EHD蛋白9.57以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人EHD蛋白9.57的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人EHD蛋白9.57的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人EHD蛋白9.57的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人EHD蛋白9.57的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人EHD蛋白9.57的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人EHD蛋白9.57異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種：(a)具有SEQ?ID?NO：1中4030-4293位的序列；和(b)具有SEQ?ID?NO：1中1-4464位的序列。

本發明另外涉及一種含有本發明多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本發明多肽的方法。

本發明還涉及一種能與本發明多肽特異性結合的抗體。

本發明還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人EHD蛋白9.57蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本發明的多肽。本發明還涉及用該方法獲得的化合物。

本發明還涉及一種體外檢測與人EHD蛋白9.57蛋白異常表達相關的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本發明多肽的量或生物活性。