[發明專利]一種新的多肽——纖維蛋白原11和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116502.X
• 申請日: 2000-06-14
• 公開（公告）號: CN1328010A
• 公開（公告）日: 2001-12-26
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C07K14/435;C07K16/00;C07K16/18;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/16;A61K38/17;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——纖維蛋白原11，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

纖維蛋白原為脊髓動物血凝固過程中的一個基本蛋白，其為一六聚體蛋白含有三個不同的鏈(α、β及γ)，這三個不同的鏈之間以二硫鍵互相連接在一起。纖維蛋白原三個鏈的N末端片段在進化上是相關的，且這三個鏈均含有鏈互相連接所需的半胱氨酸殘基。但α鏈的C末端與β及γ鏈的C末端無明顯的相似性，而β鏈的C末端與γ鏈的C末端均含有一由270個氨基酸殘基組成的結構域[Xu?X，Doolittle?R.F.，1984，Proc?Natl?Acad?Sci?U.S.A.，87：2097-2101]。該結構域是三鏈交互結合在一起，形成活性空間結構的中心區域。

研究發現，這一結構域含有四個半胱氨酸殘基參與形成兩個二硫鍵，該結構域如下圖所示：

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XXXXXXCXXXXXXXXXXXXCXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXCXXXXXCXXXXXXXXXXXXX????

‘C’：為保守的半胱氨酸殘基參與二硫鍵的形成。

‘*’：為保守序列片段的位置。

現在哺乳動物T細胞特異蛋白的C末端、果蠅Scabrous蛋白的C末端等均發現含有該結構域，該結構域在蛋白中可能參與蛋白與蛋白間的相互作用。在這一結構域的第四個半胱氨酸的周圍還含有一如下所示的保守的一致性序列片段：

W-W-[LIVMFYW]-X(2)-C-X(2)-[GSA]-X(2)-N-G(其中C涉及二硫鍵的形成)；所有的含有該結構域的蛋白均含有這一保守的一致性序列片段，該序列片段是蛋白間相互作用的重要區域。

纖維蛋白原是生物體內血液凝固過程中的一個重要組成成分，該蛋白原的缺失將導致生物體血液無法正常凝固，從而引發各種相關的血液系統疾病。同時，含有上述結構域的蛋白在生物體蛋白相互作用過程中亦起著極為重要的作用，其在各種組織均有一定的表達。該類蛋白的表達與生物體內各種免疫系統疾病的發生及一些腫瘤及癌癥的發生相關。由上可知，該蛋白在生物體內的表達異常與一些血液系統疾病、免疫系統疾病及各種腫瘤及癌癥的發生均有密切的關系。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與纖維蛋白原的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為纖維蛋白原11。

由于如上所述纖維蛋白原11蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的纖維蛋白原11蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新纖維蛋白原11蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——纖維蛋白原11以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼纖維蛋白原11的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼纖維蛋白原11的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產纖維蛋白原11的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——纖維蛋白原11的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——纖維蛋白原11的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與纖維蛋白原11異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：