[發明專利]一種新的多肽——人聯苯水解酶－相關蛋白(Bph－rp)16.06和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00116386.8
• 申請日: 2000-06-07
• 公開（公告）號: CN1327065A
• 公開（公告）日: 2001-12-19
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N9/14;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/34;C12Q1/68;A61K38/46
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

水解酶，在它們的活性位點中含有一個絲氨酸殘基。該蛋白家族由許多不同的成員構成，包括絲氨酸蛋白酶，酯酶以及脂肪酶，它們能夠催化各種底物，從而行使截然不同的生物功能。盡管這些成員顯著不同，但屬于絲氨酸依賴的水解酶超家族的密切相關的蛋白可根據底物特異性或氨基酸序列相似性而被分為幾個亞家族。聯苯水解酶-相關蛋白亞家族共同的功能是降解芳香族復合物，包括聯苯衍生物，苯酚，甲苯，以及二甲苯(Derewenda，Z.S.，and?Derewenda，U.(1991)Biochem.Cell?Biol.69，842-851)。

人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)是一種新的人絲氨酸水解酶，該蛋白的cDNA的3’-非翻譯區域內含有一個完整的Alu重復序列，該序列對于翻譯修飾Bph-rp基因表達是十分重要的，A1u轉錄物將被轉運至胞質區室。Bph-rp的氨基酸序列中含有甘氨酸-X-絲氨酸-X-甘氨酸特征序列模板，其中的活性絲氨酸殘基是催化殘基，參與水解酶降解芳香族復合物，該模板以絲氨酸水解酶為特征，并與參與降解芳香族復合物的幾種原核生物水解酶具有普遍相似性，它與降解聯苯衍生物的由bphD基因編碼的絲氨酸水解酶有最高度的同一性，因而被命名為聯苯水解酶-相關蛋白。人聯苯水解酶-相關蛋白主要在肝與腎中表達，由于該蛋白的結構特征，水解活性以及組織分布特性都決定了它在解毒過程中起作用，Bph-rp主要在藥物代謝以及解除許多有害物質的毒性中起作用，并在人體乳腺中類似類固醇激素的芳香族內源底物代謝中起作用，該蛋白及其激動劑，抑制劑，拮抗劑可用于治療乳腺癌等與降解芳香族復合物相關的疾病(Puente，X.S.and?Lopez-0tin，C.，J.Biol.Chem.270(21)，12926-12932(1995))。

通過基因芯片的分析發現，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304細胞株、LPS+的Ecv304細胞株胸腺、正常成纖維細胞1024NC、Fibroblast，生長因子刺激，1024NT、疤痕成fc生長因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生長因子刺激，1013HC、膀胱癌建株細胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌細胞株、胎皮、脾臟、前列腺癌、空腸腺癌、賁門癌中，本發明的多肽的表達譜與人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06。

由于如上所述人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人聯苯水解酶-相關蛋白(Bph-rp)16.06異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO：2氨基酸序列的多肽。