[發(fā)明專利]一種新的多肽——過氧化氫氧化還原酶9和編碼這種多肽的多核苷酸

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00115767.1
• 申請(qǐng)日: 2000-05-19
• 公開（公告）號(hào): CN1324933A
• 公開（公告）日: 2001-12-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/53
• 分類號(hào): C12N15/53;C12N9/02;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/26;C12Q1/68;A61K38/44
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--過氧化氫氧化還原酶9，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

過氧化氫具有殺傷微生物，凈化，漂白以及消毒活性，它被作為貼眼透鏡的消毒劑，織物的漂白劑以及合法的食品添加劑等廣泛使用。然而，過氧化氫可能會(huì)產(chǎn)生具高度反應(yīng)性的自由氧，它強(qiáng)烈的氧化效應(yīng)將致使蛋白變性。過氧化氫氧化還原酶是一種存在于所有需氧細(xì)胞中的酶類，它分解過氧化氫為分子氧及水，即催化兩分子的過氧化氫氧化為一分子的氧并還原為兩分子的水。它主要的功能是保護(hù)細(xì)胞免受過氧化氫的毒性作用。在真核生物及一些原核生物中它由四個(gè)相同的亞基構(gòu)成。每個(gè)亞基與一個(gè)(正鐵)血紅素Ⅸ基團(tuán)結(jié)合。其中一個(gè)保守的酪氨酸是近端的血紅素結(jié)合配體，作為血紅素近極面配體作用，含有這個(gè)殘基及其周圍氨基酸的區(qū)域構(gòu)成了第一個(gè)特征序列模板R-[LIVMFSTAN]-F-[GASTNP]-Y-x-D-[AST]-[QEH],Y，其中含有一個(gè)保守的精氨酸殘基，它參與血紅素結(jié)合。第二個(gè)特征序列模板中含有一個(gè)保守的活性位點(diǎn)殘基，組氨酸殘基，它對(duì)于酶的催化機(jī)制較為重要：[IF]-x-[RH]-x(4)-[EQ]-R-x(2)-H-x(2)-[GAS]-[GASTF]-[GAST](Murthy?M.R.N.,Reid?T.J.Ⅲ,Sicignano?A.,Tanaka?N.,Rossmann?M.G.,J.Mol.Biol.152:465-499(1981)；Melik-Adamyan?W.R.,Barynin?V.V.,Vagin?A.A.,BorisovV.V.,Vainshtein?B.K.,Fita?I.,Murthy?M.R.N.,Rossmann?M.G.,J.Mol.Biol.188:63-72(1986)；von?Ossowki?I.,Hausner?G.,Loewen?P.C.,J.Mol.Evol.37:71-76(1993))。

有研究發(fā)現(xiàn)，放療時(shí)，過氧化氫氧化還原酶增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞損傷并使正常細(xì)胞免受輻射損傷，此外有一種輸卵管過氧化氫氧化還原酶與精子膜外表面結(jié)合，因而可用來保護(hù)或保存精子，人工授精以及診斷男性或女性不育。

本發(fā)明的多肽具有上述特征序列模板，且與過氧化氫氧化還原酶家族成員有相似的生物學(xué)功能，故而被認(rèn)為是該家族的新成員，命名為過氧化氫氧化還原酶。該多肽及其激動(dòng)劑，抑制劑，拮抗劑可用于診斷及防治與過氧化氫氧化還原有關(guān)的疾病，有助于諸如纖維肉瘤等腫瘤的治療并可用來保護(hù)或保存精子，人工授精以及診斷男性或女性不育。

由于如上所述過氧化氫氧化還原酶9蛋白在機(jī)體內(nèi)重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的過氧化氫氧化還原酶9蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新過氧化氫氧化還原酶9蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽--過氧化氫氧化還原酶9以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼過氧化氫氧化還原酶9的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼過氧化氫氧化還原酶9的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)過氧化氫氧化還原酶9的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽--過氧化氫氧化還原酶9的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽--過氧化氫氧化還原酶9的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與過氧化氫氧化還原酶9異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。