[發(fā)明專利]一種新的多肽——人鋅指蛋白28和編碼這種多肽的多核苷酸

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 00115499.0
• 申請(qǐng)日: 2000-04-27
• 公開（公告）號(hào): CN1320642A
• 公開（公告）日: 2001-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--人鋅指蛋白28，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

許多細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子都屬于幾個(gè)相關(guān)蛋白家族，這些調(diào)節(jié)因子還包括各種轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子中的一個(gè)大家族集合了果蠅kruppel片段基因，該片段基因的特征是連續(xù)的重復(fù)半胱氨酸₂-組氨酸₂(C₂-H₂)鋅指蛋白(ZNF)結(jié)構(gòu)域。幾百個(gè)ZNF基因占據(jù)了人類基因組基因數(shù)目的0.01％多[Pellegrino,G.R.,and?Berg,J.M.1991.Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:671-675]。到目前為止，已有130多個(gè)ZNF基因已經(jīng)被確認(rèn)[Tommerup,N.,Aagaard,L.,Lund,C.L.,Boel,E.B.,etal.,Hum,Mol.Genet.2:1571-1575]。

所有的鋅指蛋白Kruppel家族的成員均含有28-30個(gè)氨基酸長(zhǎng)的保守的指重復(fù)序列(F/Y)XCXXCXXXFXXXXXLXXHXXXHTGEKP，其中一些特定的氨基酸殘基位點(diǎn)為高度保守的。這一序列在很多不同的鋅指蛋白中均含有多個(gè)拷貝，其拷貝數(shù)不同(鋅指?jìng)€(gè)數(shù)不同)則功能也不同。鋅指蛋白與不同長(zhǎng)度的DNA的結(jié)合依賴于指結(jié)構(gòu)的數(shù)量，多指結(jié)構(gòu)可能與復(fù)合物的結(jié)合穩(wěn)定性有關(guān)，而復(fù)合物是RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的作用位點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，許多鋅指蛋白的鋅指結(jié)構(gòu)域相互連接區(qū)域也是高度保守的，這一區(qū)域通常含有下列序列：His-Thr-Gly-Gly-Lys-Pro-(Tyr,Phe)-X-Cys，其中組氨酸與半胱氨酸為金屬離子的結(jié)合位點(diǎn)，而X為可變氨基酸殘基。這一區(qū)域?qū)τ阡\指結(jié)構(gòu)的形成是必需的，指結(jié)構(gòu)的數(shù)量將直接影響鋅指蛋白與不同長(zhǎng)度的DNA結(jié)合，且多指結(jié)構(gòu)與復(fù)合物的結(jié)合穩(wěn)定性有關(guān)[Jeremy?M.Berg,Annu.Rev.Biophys.Chem,1990,19:405-421]。

ZNF基因廣泛分布于基因組中，但通常都比較保守，主要起轉(zhuǎn)錄激活或抑制作用。研究表明ZNF基因與發(fā)育疾病以及惡性失調(diào)疾病有關(guān)。

本發(fā)明的人的基因與人鋅指蛋白Kruppel家族中的成員ZNF132在蛋白水平上有61％的同一性及76％的相似性。且兩者的蛋白序列均含有人鋅指蛋白Kruppel家族的特征性連續(xù)指重復(fù)序列及指結(jié)構(gòu)相連區(qū)域。基于以上各點(diǎn)，故認(rèn)為本發(fā)明的新基因?yàn)槿虽\指蛋白Kruppel家族的新成員，命名為人鋅指蛋白28。并以此推斷其與ZNF132相似，同為人鋅指蛋白Kruppel家族的成員，并具有相似的生物學(xué)功能。

由于如上所述人鋅指蛋白28蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人鋅指蛋白28蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人鋅指蛋白28蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽--人鋅指蛋白28以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人鋅指蛋白28的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人鋅指蛋白28的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人鋅指蛋白28的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對(duì)本發(fā)明的多肽--人鋅指蛋白28的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對(duì)本發(fā)明多肽--人鋅指蛋白28的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人鋅指蛋白28異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。