[發(fā)明專利]一種新的多肽——人beta－球蛋白調(diào)控因子10和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00115462.1
• 申請日: 2000-04-27
• 公開（公告）號: CN1320622A
• 公開（公告）日: 2001-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽——人beta-球蛋白調(diào)控因子10，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

人β-球蛋白座位控制區(qū)域(LCR)是位于ε-球蛋白上游區(qū)域中6kb-22kb這段區(qū)域的16kb長的DNA片段。5個DNA酶的敏感位點(diǎn)都位于該區(qū)域，其中4個位點(diǎn)(5’HS1-4)是紅細(xì)胞類特異性位點(diǎn)和紅細(xì)胞發(fā)育穩(wěn)定性調(diào)節(jié)位點(diǎn)，這就是說這些位點(diǎn)是紅細(xì)胞類細(xì)胞整個發(fā)育階段都作用的位點(diǎn)[Tuan,D.,Solo?mon,W.,Li,Q.and?London,I.M.1985,Proc.Natl.Acak.Sci.USA,82,6384-6?388][Forrester,W.C.,Thompson,C.,Elder,J.T.andGroudine,M.1986,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,83,1359-1363]。

人β-球蛋白座位控制區(qū)域DNA敏感位點(diǎn)2(HS2)能使β-球蛋白基因高度表達(dá)。實(shí)驗(yàn)表明HS2的復(fù)制AP1類似位點(diǎn)是增強(qiáng)子活性所必須的。編碼一個基本的亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)結(jié)合于上述位點(diǎn)的基因已經(jīng)克隆出來，并被命名為LCR因子1(LCR-F1)。該蛋白是一個新調(diào)節(jié)因子組成的蛋白家族的新成員，該調(diào)節(jié)因子蛋白家族的共同特征是有一個包含63個氨基酸的CNC結(jié)構(gòu)域作為基本結(jié)構(gòu)單元。該結(jié)構(gòu)域在CNC蛋白，NF-E2和LCR-F1中有70％的相同性。在紅細(xì)胞特異性瞬間轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中LCR-F1反式激活一個HS2/γ-球蛋白報(bào)告基因，這表明LCR-F1可能是人球蛋白基因表達(dá)LCR調(diào)節(jié)的一個關(guān)鍵因子。

LCR-F1的開放閱讀框有447個氨基酸。LCR-F1有幾個顯著特征：蛋白質(zhì)的C末端包含1個基本的亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域。在拉鏈區(qū)域的N末端3個亮氨酸被7個氨基酸殘基隔開。拉鏈區(qū)域的第四和第五個疏水氨基酸殘基是苯丙氨酸和甲硫氨酸。由7個疏水氨基酸殘基組成的拉鏈區(qū)域7個重復(fù)子。由6個氨基酸組成的連接體連接拉鏈和其他基本區(qū)域，這些基本區(qū)域包括賴氨酸和精氨酸殘基[JohnJ.Caterina,Dayid?Donze,Chiao-Wang?Sun,Dominic?J.Ciavatta?and?Tim?M.T?ownes1994,Nuc.Acid.Res.22,2383-2391]。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、PMA-的Ecv304細(xì)胞株、未饑餓的L02細(xì)胞株、砷刺激1小時的L02細(xì)胞株、砷刺激6小時的L02細(xì)胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人beta-球蛋白調(diào)控因子的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人beta-球蛋白調(diào)控因子10。

由于如上所述人beta-球蛋白調(diào)控因子10蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人beta-球蛋白調(diào)控因子10蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人beta-球蛋白調(diào)控因子10蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個目的是提供分離的新的多肽——人beta-球蛋白調(diào)控因子10以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人beta-球蛋白調(diào)控因子10的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個目的是提供含有編碼人beta-球蛋白調(diào)控因子10的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個目的是提供生產(chǎn)人beta-球蛋白調(diào)控因子10的方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供針對本發(fā)明的多肽——人beta-球蛋白調(diào)控因子10的抗體。

本發(fā)明的另一個目的是提供了針對本發(fā)明多肽——人beta-球蛋白調(diào)控因子10的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個目的是提供診斷治療與人beta-球蛋白調(diào)控因子10異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。