[發明專利]一種新的多肽——人翻譯起始因子輔助因子81和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00115451.6
• 申請日: 2000-04-27
• 公開（公告）號: CN1320614A
• 公開（公告）日: 2001-11-07
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽--人翻譯起始因子輔助因子81，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

蛋白質的生物合成是遺傳信息的翻譯過程。翻譯過程需要mRNA、核糖體、各種氨基酸、tRNA，還需要各種蛋白因子的參與，它們包括起始因子、延伸因子、終止因子。

eIF如eIF1、eIF2、eIF3、eIF4等為真核生物合成起始因子。實驗顯示，Met-tRNA_I·eIF-2·GTP三元復合物的形成是真核生物蛋白合成起始過程的第一步，第二步是Met-tRNA_I與40S核糖體亞基結合，然后Met-tRNA_I·40S·mRNA復合物形成，以上兩步驟受數種輔助蛋白因子調控(Gupta?et?al.1993；Hershey1991；Merrick?and?Hershey?1996)。在第一步中GTP結合eIF-2，形成二元復合物，然后與Met-tRNA_I^met結合，GTP結合于eIF-2增強了eIF-2對Met-tRNA_I^met的親合性，輔助因子eIF2C可使三元復合物增強穩定性，阻止它的分解，在第二步中輔助因子eIF2C也起著穩定Met-tRNA_I·40S·mRNA復合物的作用(Roy?etal.,1988)。

eIF2C首先在家兔網狀細胞溶菌素中分離得到，分子量為140KD，它易降解，三個降解多肽為94KD、50KD與25KD。eIF2C基因開放讀框序列解碼813個氨基酸，它的起始AUG位于翻譯的強信號序列(CGAGAUGG)中，在-3與+4位置含有嘌呤，在3’端的非編碼區域未發現多聚腺苷酸?？寺〉膃IF2CcDNA總的GC含量占60％，比一些人翻譯起始因子eIF-2α(GC?40％)、eIF-2β(GC?42％)、eIF-2γ(GC?43％)GC含量相對高。eIF2C基因開放讀框序列解碼多肽為90KD，其分子量與兔網狀細胞溶菌素中的140KDeIF2C的差異提示了翻譯后的修飾，用MOTIF查詢程序發現了兩個N-糖基化位點、兩個酰胺化位點、八個N-十四烷?；稽c、多個磷酸化位點。兔網狀細胞溶菌素中純化的94KD多肽是一個糖基化蛋白，有高的等電點，富含帶電氨基酸(Cheng?zou?et?al.,1998)

通過基因芯片的分析發現，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細胞株、PMA-的Ecv304細胞株、未饑餓的L02細胞株、砷刺激1小時的L02細胞株、砷刺激6小時的L02細胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發明的多肽的表達譜與人翻譯起始因子輔助因子28的表達譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發明被命名為人翻譯起始因子輔助因子81。

由于如上所述人翻譯起始因子輔助因子81蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人翻譯起始因子輔助因子81蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人翻譯起始因子輔助因子81蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾1病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽--人翻譯起始因子輔助因子81以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人翻譯起始因子輔助因子81的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人翻譯起始因子輔助因子81的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人翻譯起始因子輔助因子81的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽--人翻譯起始因子輔助因子81的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽--人翻譯起始因子輔助因子81的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人翻譯起始因子輔助因子81異常相關的疾病的方法。