[發(fā)明專利]一種新的多肽——人遍在蛋白羧酸端水解酶10和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 00115148.7
• 申請日: 2000-03-27
• 公開（公告）號: CN1315559A
• 公開（公告）日: 2001-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海博德基因開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N15/57
• 分類號: C12N15/57;C12N9/50;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/37;C12Q1/68;A61K38/48
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本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明描述了一種新的多肽--人遍在蛋白羧酸端水解酶10，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發(fā)明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應(yīng)用。

遍在蛋白C端水解酶(UCH)可水解遍在蛋白C端加合物以產(chǎn)生遍在蛋白單體。遍在蛋白C端水解酶在神經(jīng)元中普遍表達(dá)，尤其是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及與它們相關(guān)的腫瘤中特異表達(dá)(Doran?et?al.,1983)。

遍在蛋白C端水解酶在反向平行的β折疊的兩個(gè)側(cè)面都有α螺旋，β折疊與其中的一個(gè)α螺旋組成的結(jié)構(gòu)類似于類木瓜蛋白酶半胱氨酸水解酶中的結(jié)構(gòu)，高度相似于組織蛋白酶B中的結(jié)構(gòu)。UCH的活性催化位點(diǎn)由Cys、His、Asp及氧陰離子洞Gln殘基構(gòu)成。它在殘基一百多位的位置有20個(gè)無序的氨基酸殘基組成的嚕噗，涉及底物(遍在蛋白)識別的功能。UCH的底物結(jié)合變構(gòu)位點(diǎn)位于活性催化位點(diǎn)裂縫上(Johnston?SC?et?al.1997)。遍在蛋白C端水解酶家族蛋白KIAA1097開放讀框序列編碼980個(gè)氨基酸，在ORFs下游有短的重復(fù)序列Alu、MIR(Kikuno?R.Et?al.,1999)。

遍在蛋白C-端水解酶基因的錯(cuò)義突變可引起其活性的部分喪失，并引起遍在蛋白水解與群聚的異常(Leroy?et?al.1998)。

?UCH可在路易小體(Lewy?bodies)出現(xiàn)，在蛋白酶體通路中起作用，并涉及帕金森氏病。

?UCH基因突變可引起鼠細(xì)軸突營養(yǎng)失調(diào)，在幼年時(shí)期就導(dǎo)致感覺共濟(jì)失調(diào)，然后引起運(yùn)動(dòng)共濟(jì)失調(diào)。在病理上發(fā)現(xiàn)軸突的退化與神經(jīng)末梢球狀體的形成(Yamazaki?et?al.,1988)。

人類神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病的病理研究發(fā)現(xiàn)遍在蛋白結(jié)合物的漸進(jìn)累積，并發(fā)現(xiàn)了UCH基因，此外，UCH基因還在睪丸組織中發(fā)現(xiàn)(Suh?et?al.1995；Saigoh?etal.,1999；MacDonald?1999)。

通過基因芯片的分析發(fā)現(xiàn)，在胸腺、睪丸、肌肉、脾臟、肺、皮膚、甲狀腺、肝、PMA+的Ecv304細(xì)胞株、PMA-的Ecv304細(xì)胞株、未饑餓的L02細(xì)胞株、砷刺激1小時(shí)的L02細(xì)胞株、砷刺激6小時(shí)的L02細(xì)胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小腸、胎大腸、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎腎、胎脾、胎腦、胎肺以及胎心中，本發(fā)明的多肽的表達(dá)譜與人遍在蛋白羧酸端水解酶28的表達(dá)譜非常近似，因此二者功能也可能類似。本發(fā)明被命名為人遍在蛋白羧酸端水解酶10。

由于如上所述人遍在蛋白羧酸端水解酶10蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)育等機(jī)體重要功能中起重要作用，而且相信這些調(diào)節(jié)過程中涉及大量的蛋白，因而本領(lǐng)域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人遍在蛋白羧酸端水解酶10蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人遍在蛋白羧酸端水解酶10蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態(tài)下的作用提供了基礎(chǔ)。這種蛋白可能構(gòu)成開發(fā)疾1病診斷和/或治療藥的基礎(chǔ)，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供分離的新的多肽--人遍在蛋白羧酸端水解酶10以及其片段、類似物和衍生物。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人遍在蛋白羧酸端水解酶10的多核苷酸的重組載體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供含有編碼人遍在蛋白羧酸端水解酶10的多核苷酸的基因工程化宿主細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供生產(chǎn)人遍在蛋白羧酸端水解酶10的方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供針對本發(fā)明的多肽--人遍在蛋白羧酸端水解酶10的抗體。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供了針對本發(fā)明多肽--人遍在蛋白羧酸端水解酶10的模擬化合物、拮抗劑、激動(dòng)劑、抑制劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供診斷治療與人遍在蛋白羧酸端水解酶10異常相關(guān)的疾病的方法。

本發(fā)明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發(fā)明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補(bǔ)的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。