[發明專利]一種新的多肽——人CDC4類似蛋白12和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111982.6
• 申請日: 2000-03-10
• 公開（公告）號: CN1313313A
• 公開（公告）日: 2001-09-19
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/00;C07K16/18;C07K16/00;C07H21/00;C12N15/10;C12N15/11;C12N15/12;C12N15/63;C12N15/64;C12P21/00;C12Q1/68;G01N33/68;A61K38/17;A61K38/16;A61K31/7088;A61K39/395;A61P35/00;A61P7/00;A61P37/00;A61P31/00;A61P31/18
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人CDC4類似蛋白12，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

細胞周期的運轉是十分有序的，沿著G1——S——G2——M的順序進行，這是與細胞周期進行有關的基因有序表達的結果。與細胞分裂有關的基因稱為cdc(cell?division?cycle?gene)這些基因的有序表達是受周期中一些檢驗點或稱為調控點調節的。該點的作用是作用于細胞周期轉換時序的調控通路，保證細胞周期中的關鍵事件高度準確的完成。它受制于一系列特異或非特異環境信號的影響，從分子水平看是基于一些基因及其產物對外界信號的反應。細胞周期檢驗點普遍表現在高等真核生物和酵母細胞中，例如酵母細胞DNA合成前的啟動點，高等真核生物G1期中的R點，DNA損傷檢驗點，DNA復制檢驗點，G2/M檢驗點等等。上述的各個檢驗點保證了產生具有正常遺傳性能和生理功能的子代細胞，如果這些調控途徑異常，周期不能正常運轉和喪失周期關鍵事件的忠實性，從而導致遺傳性能紊亂、增殖分化異常和細胞癌變，甚至導致細胞死亡。

嗜糖釀酒裂殖酵母有一個細胞分裂調控基因家族，已發現的有四種：：cdc3,cdc4,cdc8,and?cdc12(Nurse,P.,P.Thuriaux,and?K.Nasmyth.1976.Mol.&?Gen.Genet.146:167-178)。其中細胞分裂周期調控基因(cell?division?cyclegene,CDC4)已被克隆，它編碼一個有141個氨基酸的多肽，這個蛋白與EF-手性蛋白(例如肌球蛋白輕鏈、鈣調蛋白和肌鈣蛋白)有相似性，cdc4的缺失會導致細胞質分裂無法完成，從而導致顯性的多核細胞的死亡。CDC4蛋白可以形成一個200KD大小的復合物，此復合物可結合于UTP起一定的作用。(J?Cell?Biol1995?Aug；130(3):651-60)

細胞分裂周期調控基因(cell?division?cycle?gene)編碼的蛋白是一種細胞分裂周期調控因子——CDC4，但對其結構研究的還不是很清楚，具體請查閱相關文獻。(J?Mol?Biol?1987?May?20；195(2):233-45)

從鼠的12天胚胎心臟組織的cDNA文庫中克隆到的蛋白經研究證明，細胞分裂周期調控蛋白CDC4與G蛋白betal亞基有一種相似的重復結構，根據它二級結構的高度保守性推測，這一重復結構有特定的功能。(DNA?Seq1992；3(4):213-20)

周期蛋白依賴激酶(CDK)抑制因子S1C1的降解是細胞周期倚賴性的，S1C1在早G1期是穩定的防止S期CDK早熟活化，在G1期CDK與G1期周期蛋白(cyclin)結合產生一個活化的G1期CDK-cyclin復合物后，磷酸化S1C1，促使后者通過CDC34通路被水解，然后活化的S期CDK，通過磷酸化一些關鍵底物起始DNA復制。在此通路中，其他幾種蛋白如CDC4、CDC53、SKP1等對于S1C1的降解均是十分重要的。(EMBO?J.1997?Oct?1；16(19):5966-76.)

裂殖酵母的CDC4基因產物在細胞周期的G1晚期向S期過渡中不可缺少的，免疫熒光檢驗法證明了CDC4基因產物在細胞核中的定位，已有的研究發現，CDC4基因產物是細胞核骨架的重要組分蛋白，但CDC4基因產物的具體功能還有待進一步研究。(Biochem?Biophys?Res?Commun?1990?Nov?15；172(3):1324-30)

有絲分裂細胞周期的突變的cdc4基因，會阻遏核DNA復制的起始、復制后紡錘體的分離。在減數分裂中，cdc4基因也有極其重要的作用。(Genetics?1977May；86(1):57-72)

SEL-10也屬于CDC4蛋白家族，在對線蟲的研究中發現，SEL-10是lin-12/Notch調控信號的負調控因子，SEL-10可以提高泛素刺激的lin-12/Notch調控信號，從而SEL-10可以調控lin-12/Notch的活性，并可以間接的調控腫瘤的發生。(Genes?Dev?1997?Dec?1；11(23):3182-93)

SEL-10與SEL-12結合在一起形成復合物調控presenilin基因水平的調節。Presenilin基因包括PS1和PS2，它們的突變會導致人的Alzheimer氏綜合癥。(Proc?Natl?Acad?Sci?U?S?A?1998?Dec?22；95(26):15787-91)