[發明專利]一種新的多肽——人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17和編碼這種多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 00111854.4
• 申請日: 2000-03-02
• 公開（公告）號: CN1311302A
• 公開（公告）日: 2001-09-05
• 發明（設計）人: 毛裕民;謝毅
• 申請（專利權）人: 上海博德基因開發有限公司
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;C12N15/52;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/25;C12Q1/68;A61K38/43
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本發明屬于生物技術領域，具體地說，本發明描述了一種新的多肽——人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本發明還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。

分泌糖蛋白的多肽合成由以下兩個修飾步驟組成：蛋白多聚肽鏈的折疊與聚集及低聚糖N端修飾與空間構型的組成。其中，蛋白多聚肽鏈的折疊與聚集由糖蛋白葡萄糖基轉運酶(UDP-glucose)催化來完成，在該酶的催化作用下，形成了具有正常空間構型的分泌糖蛋白，為糖蛋白發揮正常的生物學功能提供了前提條件。

人們已從各種不同的生物中克隆得到了不同的糖蛋白葡萄糖基轉運酶，這些酶構成了一獨立的酶家族。1995年，Carol?G.Parker等人從果蠅胚胎組織分離、克隆得到了糖蛋白葡萄糖基轉運酶，該酶在生物體內催化將[14C]葡萄糖從UDP-[14C]葡萄糖轉運至各種細胞外基質中的糖蛋白，以完成對這些蛋白的修飾，并使之形成特定的空間構型，以發揮其生理學功能[Carol?G.Parker,Liselotte?I.Fessler?et?al.,1995,EMBO?J,14:1294-1303]。該酶蛋白序列與許多糖基轉運蛋白不同，而其與一些細菌脂多糖甘油轉運酶有較高的相似性。

對不同來源的糖蛋白葡萄糖基轉運酶的蛋白序列進行比較發現，各種糖蛋白葡萄糖基轉運酶的序列中含有許多相似的序列片段，其中一些是高度保守的、不變的區域，如有三個疏水性區域、(K/R)X(I/L)(Y/F)XDAD及DQDXXN，這些序列片段在該酶家族的成員中均是高度保守的，在蛋白活性構型的形成過程及作用過程中均起著重要的作用。這些位點的突變將直接導致蛋白的表達異常及其相關的蛋白修飾及合成過程的異常，從而引發各種相關的疾病。分泌糖蛋白在生物體內有著各種重要的作用，其通常調節著生物體內各種蛋白及物質的轉運，其表達異常通常與一些相關的物質代謝紊亂性疾病、蛋白代謝紊亂性疾病及相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。

本發明的新的人糖蛋白葡萄糖基轉運酶與果蠅的糖蛋白葡萄糖基轉運酶在蛋白水平上有35％的同一性和55％的相似性，且亦含有糖蛋白葡萄糖基轉運酶家族其它成員所共有的各種特征性序列片段，兩者均為糖蛋白葡萄糖基轉運酶家族的成員，且具有相似的生物學功能。該蛋白在生物體內調控各種細胞內分泌蛋白的合成過程，其表達異常通常將導致分泌蛋白的合成異常，從而影響一系列與之相關的物質代謝過程。該蛋白通常與生物體內一些相關的發育紊亂性疾病、物質代謝紊亂性疾病及相關組織的腫瘤及癌癥等疾病的發生密切相關。

由于如上所述人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。

本發明的一個目的是提供分離的新的多肽——人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17以及其片段、類似物和衍生物。

本發明的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17的多核苷酸的重組載體。

本發明的另一個目的是提供含有編碼人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。

本發明的另一個目的是提供生產人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17的方法。

本發明的另一個目的是提供針對本發明的多肽——人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17的抗體。

本發明的另一個目的是提供了針對本發明多肽——人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。

本發明的另一個目的是提供診斷治療與人糖蛋白葡萄糖基轉運酶17異常相關的疾病的方法。

本發明涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含：具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ?ID?NO:2氨基酸序列的多肽。

本發明還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體：

(a)編碼具有SEQ?ID?No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；

(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。